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ELISA試劑盒樣本處理及要求
更新時(shí)間:2013-07-26   點(diǎn)擊次數(shù):1546次

ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上
清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。 
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心
20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。 
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程
中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。 
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/
分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度
達(dá)到 100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右
(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。ELISA試劑盒保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標(biāo)
本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其
余冷凍備用。 
注意事項(xiàng): 
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)
行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融. 
2.ELISA試劑盒不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

上海通蔚生物科技有限公司

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