小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意要點(diǎn):
血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。
混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存按小鼠ELISA試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。
小鼠ELISA試劑盒使用方法:
1、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
2、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
3、組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
4、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
對于科研人員來說小鼠ELISA試劑盒原理和操作步驟并不陌生,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,操作過程中夾雜著洗滌和封閉步驟。如果操作不合理,也會很大程度上影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時我們是否能獲得有意義而且準(zhǔn)確的信息,這在很大程度上取決于操作結(jié)果的正確與否。
上海通蔚生物有限公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì)由具有資深行業(yè)背景和豐富市場經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人士組成,致力于為生命科學(xué)研究領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,我們在為客戶測定試劑時大大提高了成果的實(shí)在度,及其便利度。為顧客供給了便利,減少了試驗(yàn)周期,讓試驗(yàn)更加實(shí)在牢靠!
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